· polyacrylamidegel acrylamide monomer، polymerization جي شروعاتي مواد، catalyst، ۽ لوڻ ۽ بفر جو حق گڏجي گڏ ڪرڻ گهرجي.
· acrylamide۽ BIS (N، N' - ميٿيلين ڊبل ايڪريلامائيڊ) هڪ مونومر فارم جيل ميٽرڪس آهي.
· امونيم persulfate Adhesive polymerization عمل شروع.گلو جي ٺهڻ لاءِ پاڻي ۾ تيار ڪيل 10٪ امونيم پرسلفيٽ حل جي ضرورت آهي.معلومات جو تمام گهڻو اشارو ڏنو ويو آهي هڪ گهربل استعمال جي ضرورت آهي.بهرحال، 10٪ حل ڪيترن ئي هفتن تائين 4℃ تي رکي سگھجي ٿو بغير سرگرمي جي اهم نقصان جي.10 ml تائين ٺاهيو ۽ رد ڪريو جڏهن گلو مجموعي ۾ ناڪام ٿئي.
ترڪيب: جو سيڪڙوacrylamideتسلسل ۾ گلو ۽ پروٽين گلو هڪجهڙا نه آهن.جيڪڏهن اڳ ۾ ٺهيل acrylamide استعمال ڪندي: BIS حل، پڪ ڪريو ته صحيح بوتل حاصل ڪريو.
· TEMED (N, N, N ', N' - tetramethyl ethylenediamine) هڪ ڪيٽيليسٽ آهي، هڪ ناسي بوتل ۾، فرج ۾ رکيل آهي.گلو لڳائڻ کان اڳ ۾ شامل ڪريو.
· polyacrylamide electrophoresis electrophoresis ۾ استعمال ٿيل گلاس کي هر دفعي کان اڳ ۽ پوءِ ڌوئڻ گهرجي.اليڪٽرروفورسس کان پوءِ، نرم برش ۽ ڪپڙي سان گرم صابڻ واري پاڻي ۾ ڌوئي، ڊسٽيل پاڻي سان ڌوئي ۽ سڪي وڃڻ لاءِ بيٺو.
· نمي ۽ مٽي ٿي سگھي ٿو سوراخ پوليمر سان.Electrophoresis کان اڳ، شيشي جي پليٽ کي گلاس صاف ڪندڙ سان صاف ڪريو ۽ ان کي نرم برش سان مسح ڪريو.ڀريل پاڻي سان ڌوء ۽ ڪاغذ جي مسح سان چڱي طرح سڪي.ڪاغذ سان مسح ڪرڻ کان اڳ 70٪ ايٿانول سان ڌوئڻ سان صاف ڪرڻ ۽ خشڪ ٿيڻ کي تيز ڪرڻ ۾ مدد ملندي آهي.ڪاميابيءَ سان acrylamide جا نمونا شامل ڪريو: BIS، پاڻي، بفر حل، امونيم پرسلفيٽ، TEMED.چڱي طرح ڇڪيو ۽ فوري طور تي وجھو.
اهو ضروري ناهي ته پوليمرائيزيشن کان اڳ polyacrylamide کي ختم ڪرڻ.(Acrylamide بلبلن کي هٽائڻ لاءِ خلا ۾ رکيا ويندا هئا ڇاڪاڻ ته آڪسيجن پوليمرائيزيشن کي روڪيندي آهي.)
افقي گلو پوائنٽ نموني جا ٽوٽڪا.
· ڪارو پيپر جو ٽڪرو ھيٺئين دٻي ۾ رکو، ڪارو پس منظر وڌيڪ واضح طور ڏسڻ لاء ڪجھ نمونو سوراخ ٺاھيو.
· گلو ٽينڪ سان ڀريل بفر، صرف کولائيڊ مٿان.
· جيڪڏهن ڪنڊ ۾ روشني آهي، روشنيون ڦيرايو، روشني کي چمڪائڻ ڏيو.نموني کي پائپٽ ۾ ڇڪيو.
· خودڪار پائپنگ ڊوائيس استعمال ڪندي.
· 10-200 mu ۾ 1 مائع حرڪت واري نقطي نموني تي اڪثر پوائنٽن ۾ استعمال ڪري سگھجي ٿو.تمام ننڍڙن نمونن جي سوراخن لاءِ (10μ1 کان گھٽ)، ڊگھي پائيپٽ هيڊ جو استعمال گلو جي ترتيب ڏيڻ لاءِ وڌيڪ آسان آهي.
· پائپنگ صرف نموني ۾ وجھي، سست رفتاري سان هلندڙ سيال کي اندر اندر اندر داخل ڪرڻ.نموني گليسرين سان چپڪي ٿي سگھي ٿو، ۽ تيز پمپنگ پائيپٽ جي سر ۾ هوائي بلبلز کي ڇڪي سگھي ٿو.
· نمونيون پائپنگ هيڊ کي سانس ۾ اندر اندر داخل ڪرڻ کان پوءِ، فلوئڊ هيڊ کي پائيپ جي ڪنڊ تي نرميءَ سان منتقل ڪندا يا پيپر وائپنگ پيپر کي قطرن جي ٻاهران مائع سر چوسندا.محتاط رھو ته نموني کي نه چوس.
نموني کي نموني سوراخ ۾ رکو
· پائپنگ ڊيوائس کي ٿورڙو دٻاءُ رکڻ لاءِ، نمونن کي اوور فلو مائع سر کي ٿورو اڳتي وڌايو.
· پائپنگ هيڊ بفر ۾ داخل ڪيو ويو، جڳهه جي سوراخ کان ٿورو مٿي، مثبت دٻاء برقرار رکڻ.پائپٽ جي ٽپ کي هڪ ننڍڙي سوراخ ۾ داخل ڪري سگهجي ٿو.
· سست ۽ مسلسل نموني ٻاهر.پائپٽ ٽپ پوائنٽ نموني سوراخ جي مٿان رکيل آهي، ۽ نموني سوراخ ۾ ٻڏي ويندي.نموني سوراخ ڀرڻ جي بدران نموني کي ٻوڙڻ ڏيو.
· هڪ ڀيرو مائع سر سان نموني جو آخري قطرو، مائع ٻئي ٽنگ ڏانهن منتقل ٿيندو، مائع جي حرڪت کي آهستگي سان وڌايو، بفر کان ٻاهر وڃو
عمودي گلو نموني ڪيئن ڪجي؟
· عمودي گلو پوائنٽ نموني سوراخ شيشي جي ٻن ٽڪرن جي وچ ۾ ٺهيل.تمام پتلي گلو ۾، پائيپٽ سر به ٻن شيشي جي پليٽن جي وچ ۾ داخل نه ٿو ڪري سگھجي.گليسرين کي ڏسو!پائپٽ سر کي نموني جي سوراخ تي رکو ۽ نمونو سوراخ ۾ ٻڏي ويندو.
· پوائنٽ جو نمونو اڳ ۾، پڪ ڪريو ته پوليوپروپين جي عمودي نقطي کي رکڻ لاء ايسل جيل نموني سوراخ صاف ڪيو ويو آهي.غيرپوليمرائز ٿيل ايڪريلامائيڊ کي ڌوء ۽ پاڻي جيڪو نموني سوراخ جي تري ۾ ظاهر ٿي سگھي ٿو.پاڻي نموني سوراخ کي تمام ننڍو ڪري سگھي ٿو.هڪ 25ml يا 50ml سرنج ۽ 18-گيج سوئي استعمال ڪريو.اليڪٽرروفورسس بفر ۾ وجھو ۽ نموني سوراخ کي احتياط سان فلش ڪريو.
· اهو نمونو سوراخ ڏسڻ ڏکيو ٿي سگهي ٿو، پر ساڳئي وقت، باقي آسان آهي.جيڪڏهن اضافي سوراخ آهن، نموني بفر کي بروموفينول نيري سان آزمائي سگهجي ٿو.
پوسٽ ٽائيم: مارچ-31-2023